PCR技術特異性強、靈敏度高、對檢測樣品要求低、方便快捷等優(yōu)點，廣泛應用于各種臨床診斷。目前國內(nèi)二級以上的醫(yī)院都在開展PCR技術的各種臨床應用，PCR實驗室是承載PCR技術應用的設施，實驗室的合理設計才能確保檢測結(jié)果的可靠性，所以PCR實驗室的設計和建設越來越受到建設單位的重視，博泰小編帶大家了解PCR實驗室平面布局相關知識。

一、平面功能分區(qū)要點分析

根據(jù)《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》1.1條的要求，PCR實驗室一般由試劑儲備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增分析區(qū)4個區(qū)域組成。PCR實驗室區(qū)域的設置并不是一成不變的，以下幾種情況需要說明：

①如果樣本在擴增之前需要粉碎處理，則需要增加一個區(qū)域用于樣品的粉碎;

②如果采用實時熒光PCR法，則擴增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個區(qū);

③如果采用全自動化PCR分析儀，則標本制備區(qū)、擴增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個區(qū)。

二、實驗室功能與設備設計要點分析

1、試劑儲備區(qū)

該區(qū)域主要完成試劑和主反應混合液的儲存、配制和封裝工作。所有運送到該區(qū)域的試劑和材料不應經(jīng)過其他區(qū)域，試劑和原材料應在本區(qū)內(nèi)儲存和制備。本區(qū)域的氣壓應相對外界保持正壓。該區(qū)域的設備主要是冰箱、天平、混勻器、低速離心機、加樣器、可移動紫外燈等。由于該區(qū)域有多種試劑，所以“安全”應是平面設計首要考慮因素，平面設計時應保持通風流暢、逃生暢通。首先，實驗臺布置在房間的兩側(cè)，中間的過道全部通向走廊便于疏散。同時根據(jù)國際人體工程學的標準，實驗臺與實驗臺通道設計為1500mm，中間的通道可滿足兩邊坐人中間過人的要求。

2、標本制備區(qū) 

①該區(qū)域的功能是樣本的保存、核酸提取和貯存、樣本加入擴增反應管和測定DNA的合成。樣本應直接運送至該區(qū)并儲存在本區(qū)內(nèi)，不得經(jīng)過其他區(qū)域。對于氣流壓力的控制，由于在本區(qū)內(nèi)加樣操作可能產(chǎn)生氣溶膠，為避免氣溶膠擴散出去對外界造成污染，本區(qū)應對外界保持負壓;同時本區(qū)相對于擴增反應混合物配制和擴增區(qū)以及擴增產(chǎn)物分析區(qū)為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。

②該區(qū)域的設備主要是生物安全柜、加樣器、臺式高速離心機、臺式低速離心機、水浴鍋、冰箱、混勻器和可移動紫外燈等。其中需要注意的是，生物安全柜最好選用B2型，這種生物安全柜所有的吸入氣流和垂直氣流都經(jīng)過高效過濾器過濾后排到室外，不再進入生物安全柜循環(huán)或者返回該區(qū)域，這種生物安全柜可避免提取核酸在柜內(nèi)反復循環(huán)，造成標本之間交叉“污染”，出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

3、擴增區(qū)

該區(qū)域的功能是DNA擴增和擴增片段的測定。此外，反應混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應混合液和已制備的DNA模板(來自標本制備區(qū))的加入等也可在本區(qū)內(nèi)進行。對于氣流壓力的控制，相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區(qū)內(nèi)不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內(nèi)進行。該區(qū)域的設備主要是核酸擴增熱循環(huán)儀、加樣器、超凈臺等。其中熱循環(huán)儀的電源應專用，并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS，以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響。

4、分析區(qū)

該區(qū)域的功能是擴增產(chǎn)物的分析。該區(qū)域可能會用到某些可致基因突變的有毒物質(zhì)，應特別注意實驗人員的安全防護。對于氣流壓力的控制，該區(qū)域是PCR實驗的最后一步，壓力應為最低，相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。該區(qū)域的設備主要是加樣器、電泳儀(槽)、電轉(zhuǎn)印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標儀和洗板機等。

三、人流與物料流線設計要點分析

進入實驗室區(qū)域工作人員應該按照以下路徑：走道→緩沖間→實驗區(qū)。工作人員退出實驗室的路徑為：實驗區(qū)→緩沖間→走道。進入各個區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開時，不得將工作服帶出。這種人員的單向流動可以降低因人員的流動帶來的交叉污染風險。所有的物品進入實驗區(qū)必須經(jīng)過雙扉互鎖傳遞窗，利用傳遞窗消毒后才可進入，實驗室內(nèi)所有物品也必須經(jīng)過傳遞窗傳遞到實驗室以外的清潔公共區(qū)。這種物品有組織的單向流動可以降低物品的差錯和混淆的風險。

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