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細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)規(guī)劃


 細(xì)胞培養(yǎng)是一種無(wú)菌技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無(wú)微生物和不受其他有害因素的影響。為防止微生物污染和有害因素的影響,細(xì)胞培養(yǎng)室要求環(huán)境清潔,空氣清新、干燥、無(wú)塵。博泰小編帶大家了解細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)規(guī)劃相關(guān)知識(shí)。

 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室由無(wú)菌操作區(qū)、孵育區(qū)、制備區(qū)、儲(chǔ)藏區(qū)、清洗和消毒滅菌區(qū)6部分組成,這些區(qū)域的共同特點(diǎn)是房間要寬敞、明亮,地面要便于清潔、防滑,墻壁的質(zhì)地光滑堅(jiān)硬,儀器設(shè)備布局合理,方便操作,避免交叉干擾,陳設(shè)簡(jiǎn)潔,便于清掃。

一、無(wú)菌操作區(qū)

理想的無(wú)菌操作室應(yīng)劃為三部分:

1. 更衣室―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。

2.緩沖間―位于更衣間與操作間之間,用于準(zhǔn)備工作,還有防止污染的作用,以保證操作間的無(wú)菌環(huán)境,同時(shí)可放置恒溫培養(yǎng)箱以及必需的小型儀器。

3.無(wú)菌操作間―無(wú)菌操作間則專用于無(wú)菌操作、細(xì)胞培養(yǎng),其大小要適當(dāng),且其頂部不宜過(guò)高以保證紫外線的滅菌效果;墻壁光滑無(wú)死角以便清洗和消毒,無(wú)菌操作間容積小且為密閉式,一般無(wú)菌操作間的空氣消毒用紫外線燈,有的實(shí)驗(yàn)室使用無(wú)臭氧紫外線消毒器或電子消毒滅菌器。

二、孵育區(qū)

孵育區(qū)也稱培養(yǎng)區(qū),本區(qū)對(duì)無(wú)菌的要求雖不比無(wú)菌區(qū)嚴(yán)格,但仍需清潔無(wú)塵,因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來(lái)往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行,后者費(fèi)用高,一般實(shí)驗(yàn)室多采用孵箱進(jìn)行工作。

三、制備區(qū)

制備區(qū)主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。應(yīng)設(shè)有試劑柜、器械柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)和上水道、電源等,配備的主要儀器設(shè)備有水純化裝置、天平、微波爐、pH計(jì)、抽氣泵、電爐、培養(yǎng)分裝器、各種規(guī)格的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶等。在有天平、pH計(jì)、磁力拌器等設(shè)備下完成制備以后,應(yīng)在無(wú)菌操作臺(tái)進(jìn)行過(guò)濾除菌。液體制備直接關(guān)系組織細(xì)胞養(yǎng)的成敗,因此必須嚴(yán)格無(wú)菌操作。

四、儲(chǔ)藏區(qū)

儲(chǔ)藏區(qū)主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無(wú)菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,此環(huán)境也需要清潔無(wú)塵。為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃。細(xì)胞的凍存過(guò)程需要一系列程序降溫,一般為4 ℃下存放30min。轉(zhuǎn)放-20 ℃ 1 h,再轉(zhuǎn)入-80—-70℃過(guò)夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃)。因此儲(chǔ)存區(qū)必須配備冰箱、低溫冰箱、超低溫冰箱和液氮罐等設(shè)備。

五、清洗和消毒滅菌區(qū)

清潔和消毒滅菌區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開(kāi),主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作,應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌鍋、細(xì)菌過(guò)濾設(shè)備、電熱干燥箱、消毒柜、排風(fēng)設(shè)備等。

六、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)要求

1.環(huán)境要求

溫度:儀器還是操作對(duì)溫度沒(méi)有特殊要求,維持舒適的溫度即可,比如18~26度。濕度:過(guò)高的濕度會(huì)導(dǎo)致微生物的滋生,所以建議正常維持濕度在70%以下。潔凈度:細(xì)胞實(shí)驗(yàn)對(duì)潔凈區(qū)并沒(méi)有要求,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)里面只有細(xì)胞操作的時(shí)候要求無(wú)菌的環(huán)境,這時(shí)要求有局部的百級(jí),通??梢岳贸瑑襞_(tái)或者生物安全柜來(lái)實(shí)現(xiàn)。細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌環(huán)境要求很高,在細(xì)胞操作時(shí),一般需要在100級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行。

2.圍護(hù)結(jié)構(gòu)要求

雖然實(shí)驗(yàn)的操作對(duì)大環(huán)境沒(méi)有特殊要求,不過(guò)最好能有不產(chǎn)塵、不積塵的環(huán)境,能保證室內(nèi)的清潔,并且易于清洗、不容易滋生微生物,所以在選擇維護(hù)結(jié)構(gòu)時(shí),選用彩鋼板、醫(yī)療板等潔凈板材是比較好的選擇,為了保證室內(nèi)的通透性,可以布置密閉窗。

3.消毒

通常做完實(shí)驗(yàn)后,都需要做終末消毒,室內(nèi)需要安裝紫外燈,利用紫外燈對(duì)空氣和表面消毒。

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